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1,为什么切胶回收

因为想要“纯化目的片段”,不想有里面有各种酶、缓冲体系 及一些非目的片段啊!
回收胶和检测胶成分差不多,只是回收胶要求浓度大些,这样割胶的时候不会把胶弄碎

为什么切胶回收

2,dna回收切胶时是把全部带型一样的放在一起吗

这个需要看具体情况,带型一样不代表DNA序列一样,混在一起有可能回收得到的DNA是有不同序列的。另外,做胶回收的柱子的吸附量是有限的,所以也不能把太多的DNA混在一起过一个柱子。
应该不是吧。

dna回收切胶时是把全部带型一样的放在一起吗

3,有谁知道PCR扩增中 什么是割胶回收 该怎么操作

虽然我很聪明,但这么说真的难到我了
将PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳,将目的产物的条带用刀片切下来,用一定的溶剂把胶溶解,然后回收溶液中的DNA片断,这个就是胶回收。至于具体的操作步骤和溶液,都有现成的试剂盒卖的。很多生物技术公司都做。比如,比较好的有TAKARA的。试剂都是配好的,有详细的操作步骤,按照那个来就可以了。只要有离心机和移液器就可以操作。

有谁知道PCR扩增中 什么是割胶回收 该怎么操作

4,切胶回收DNA

如果只是为了检测dna片段,不需要很大的量一般几微升就够了。希望可以帮到你回收胶是检测胶的集合,可以把所有的dna产物电泳后回收,一般当需要dna的量大且浓度高的时候
不太清楚你用的是什么方法,不过用pH8.0的平衡酚(Phenol, equilibrated to pH 8.0)和酚-氯仿反复抽提效果还是不错的,一般后续试验,比如PCR或者连接都是可以的。不然可以考虑转膜的办法,可能可以更干净些?传统回收方法还是比较多的,可以参考一下。

5,我对载体进行切胶回收后一部分酶切结果正确另一部份做转化

载体不是没必要作回收吗?不是空载体吧?空载体怎么还酶切结果正确呢?如果不是空载体,确定插入为点是你预定的位点吗?不是插抗性基因里了吧?酶切与转化的时间间隔多长?会不会转化时已经降解了?最可能的还是感受态的问题,或者转化的操作。就知道这些,才疏。。。
双酶切胶回收后片段浓度大概多少如果你是测紫外定浓度,来判断酶切是否完全,这个方法是不靠谱的.只能大致判断你的回收效率.要验证是否酶切完全,一是看跑胶时的条带数(也不完全靠谱,比如少量质粒没切开,但形成的条带弱,看不见),二是通过连接转化实验,看其自连情况如何.想把质粒切好,主要是把酶切实验做好,时间、温度、酶量控制好.

6,DNA为什么要回收

要回收的DNA说明是有用的。例如,通常经过酶切的DNA分子要进行凝胶电泳,将杂带和你要的条带区分看,并把你要的那部分回收,充分除盐,以进行后续的DNA连接等操作。再如,经过PCR扩建的基因片段也是要进行凝胶电泳并回收的。因为PCR的产物除了你要的基因片段之外,还有模板、primer、错配片段等不需要的基因片段,进行凝胶电泳可以将它们进行初步分离,之后回收你的PCR产物才能进行后续的分子实验。
如果你是指的切胶回收,是因为一个dna样品中有可能混有多个不同大小的dna片段,我们需要通过电泳将这些片段分离开,再将含有目的dna片段的胶切下来回收其中的dna片段,达到纯化的目的。

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