酶的回收率，酶结合效率和酶活回收率这两项指标分别有什么意义
来源：整理 编辑：皮来回收 2023-11-21 10:01:25
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1，酶结合效率和酶活回收率这两项指标分别有什么意义
watermelon and picked it from the vine
2，酶蛋白纯化倍数等计算
回收率（产量%）=每次总活力/第一次总活力。所以：80.9%
一般是用比活力来计算纯化倍数比较总活的话一般是计算回收率
3，酶活力计算题
回收率为x
20*50=10*24x
x=0.24
蛋白质的平均分子量是不变的，因此可以用质量浓度比代替摩尔浓度比,对酶来说应该是一级反应，也就是说反应速率和酶浓度成正比，所以用速率比代表酶浓度比
倍数设为y
24/20=（0.48/0.1）y
y=4
4，什么是酶的回收率和纯化倍数
酶的纯度倍数=(每次比活力）/（第一次比活力）其中：比活力＝活力单位数／mg蛋白（氮）=总活力单位数/总蛋白（氮）mg酶活力(Enzyme Activity)也称酶活性,履指酶催化一定化学反应的能力.酶活性是研究酶的特性,分离纯化以及酶制剂生产和应用时的一项不可缺少的指标.酶活力是用在一定条件下,它所催化某一反应的反应初速度来表示.酶反应速度(指初速度)可用单位时间内单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示.其单位为mol/s。纯化倍数是纯化后的比活除以纯化前的比活。
5，酶的总活力和比活力
酶活力是酶催化反应的能力，用酶活单位表示；在酶的纯化过程中常表示酶的回收率。比活力是单位质量的酶制剂所具有的酶活单位数，在纯化过程中，它所反映的是酶制剂的纯度。酶的活力单位在最适条件下，每分钟内催化1微摩尔（μmol）底物转化为产物所需的酶量。“每克酶单位含100酶活力单位”--应该是“每克酶制剂含有100个酶活力单位”，也可以理解成一分钟之内可以将100微摩尔底物催化成产物，其实说的是酶的纯度，含酶量。应用比活力 为每毫克蛋白质所具有的酶活力单位数，一般用酶活力单位/mg蛋白质表示。酶的比活力在酶学研究中用来衡量酶的纯度，对于同一种酶来说，比活力越大，酶的纯度越高。利用比活力的大小可以用来比较酶制剂中单位质量蛋白质的催化能力，是表示酶的纯度高低的一个重要指标。以上内容参考：百度百科-酶的比活力酶的比活力1、在特定条件下，单位重量（mg）蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。2、比活力(性)(Specific Activity)是酶纯度的量度,即指:单位重量的蛋白质中所具有酶的活力单位数,一般用IU/mg蛋白质来表示.一 般来说,酶的比活力越高,酶越纯.。3、比活力 为每毫克蛋白质所具有的酶活力单位数，一般用酶活力单位/mg蛋白质表示。酶的比活力在酶学研究中用来衡量酶的纯度，对于同一种酶来说，比活力越大，酶的纯度越高。利用比活力的大小可以用来比较酶制剂中单位质量蛋白质的催化能力，是表示酶的纯度高低的一个重要指标。米氏方程v=Vmax×[S]/（Km+[S])，这个方程称为Michaelis-Menten方程，是在假定存在一个稳态反应条件下推导出来的，其中 Km 值称为米氏常数，Vmax是酶被底物饱和时的反应速度，[S]为底物浓度。酶活力的度量单位。1961年国际酶学会议规定：1个酶活力单位是指在特定条件（25℃，其它为最适条件）下，在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量，或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。酶的比活力（specific activity）代表酶制剂的纯度。根据国际酶学委员会规定比活力用每毫克蛋白所含的酶活力单位数表示。对于同一种酶来说，比活力愈大，表示酶的纯度愈高。1、在特定条件下，单位重量（mg）蛋白质或rna所具有的酶活力单位数。2、比活力(性)(specific activity)是酶纯度的量度,即指:单位重量的蛋白质中所具有酶的活力单位数,一般用iu/mg蛋白质来表示.一 般来说,酶的比活力越高,酶越纯.。3、比活力 为每毫克蛋白质所具有的酶活力单位数，一般用酶活力单位/mg蛋白质表示。酶的比活力在酶学研究中用来衡量酶的纯度，对于同一种酶来说，比活力越大，酶的纯度越高。利用比活力的大小可以用来比较酶制剂中单位质量蛋白质的催化能力，是表示酶的纯度高低的一个重要指标。
6，求酶活性的计算方法
先去教科书看一下酶活单位的定义，这个定义是用来表示酶催化反应的速率的。这样应该可以了吧一、实验目的：（1）掌握sod酶的提取、分离、检测一般步骤。（2）了解酶在提取过程中的两个参数：回收率、纯化倍数。（3）掌握离心机的使用。二、实验原理: 邻苯三酚在碱性条件下，能迅速自氧化，释放出o2-，生成带色的中间产物，中间物的积累在滞留30～45s后，与时间成线性关系，一般线性时间维持在4min的范围内，中间物在420nm波长处有强烈光吸收。当有sod存在时，由于它能催化o2-与h+结合生成o2和h2o2，从而阻止了中间产物的积累，因此，通过测定光吸收即可求出sod的酶活性。三、实验试剂：大蒜、冷丙酮、磷酸缓冲液（ph7.8，0.05mol/l)、氯仿-乙醇混合液、邻苯三酚、浓盐酸、天平、石英砂、研钵、冷冻离心机、50ml离心管 8个、紫外-可见分光光度计、250ml三角瓶8个、玻璃棒8根、试剂瓶250ml 3个、500ml 3个、250ml烧杯16个、试管带胶塞80根、移液管各5根四、实验步骤：（1）sod提取：称取5g大蒜蒜瓣，加入石英砂研磨破碎细胞，加入15ml的ph7.8 0.05mol/l的磷酸缓冲液，研磨搅拌20分钟，使sod充分溶解，6000rpm离心，弃去沉淀，得上清液。(留出1ml备用，准确量取剩余上清液体积，记录)（2）除杂蛋白：提取液加入1/4体积的氯仿-乙醇混合液搅拌10min，6000rpm离心15min去沉淀，得粗酶液。（取1ml粗酶液备用,精确测量剩余粗酶液体积）（3）sod酶的沉淀分离： 剩余的粗酶液中加入等体积的冷丙酮，搅拌15min，6000rpm离心15min，得到sod酶沉淀。将沉淀先加2ml磷酸缓冲液，溶解后再加3ml混匀。6000rpm离心15min，取上清得到sod酶液。取1ml备用，其余量取体积。（4）粗酶液活性测定：提取液、粗酶液、酶液中sod活力检测，具体步骤如下。加入邻苯三酚后迅速混匀，准确计时4min，加一滴浓盐酸停止反应，420nm测吸光值。试剂/（ml）空白管对照管od1提取液od2粗酶液od2酶液od2ph8.3缓冲液33333sod提取液000.10.10.1蒸馏水21.81.71.71.7室温放置20min邻苯三酚00.20.20.20.2（5）溶液中可溶性蛋白含量测定：分别从1ml备用的提取液、粗酶液、酶液各取0.3ml按以下倍数稀释，260nm/280nm测定吸光值，按公式计算蛋白质浓度。提取液稀释：50 ×粗酶液稀释：20 ×酶液稀释：10 ×五、实验数据： 提取液粗酶液酶液总体积（ml）提取液粗酶液酶液260nm吸光度值280nm吸光度值公式蛋白质浓度(mg/ml)=(1.45a280－ 0.74a260) ×稀释倍数蛋白质浓度（mg/ml）对照管（od1）提取液（od2）粗酶液（od2）酶液（od2）420nm吸光值六、实验结果及数据处理：（1）酶活力单位提取液酶活力单位：=2（od1-od2）×5/0.1=粗酶液活力单位：=2（od1-od2）×5/0.1=酶液活力单位：=2（od1-od2）×5/0.1=（2）总活力提取液总活力u=活力单位×总体积=粗酶液总活力=活力单位×总体积=酶液总活力=活力单位×总体积=（3）比活力提取液酶液比活力u/mg=活力单位/蛋白质浓度=粗酶液比活力u/mg=活力单位/蛋白质浓度=酶液比活力u/mg=活力单位/蛋白质浓度=（4）纯化倍数粗酶液纯化倍数=粗酶液比活力/提取液比活力=酶液纯化倍数=酶液比活力/提取液比活力=（5）回收率 粗酶液回收率=粗酶液总活力/提取液总活力=酶液回收率=酶液总活力/提取液总活力=七、实验结果误差分析：（1）研磨和离心大概还不够充分。（2）由于测量仪器的精密度引起的误差。（3）在操作的过程中，加入邻苯三酚后未混合均匀，可能致使化学反应进行得不很充分，这可能是造成实验数据与预期不符的一个原因；（4）在实验过程中，所需化学试剂加入的量不是很准确，这可能是实验数据出现问题的另一个原因；（5）此外，实验本身还很粗糙，酶的提取、分离和纯化都不能十分彻底，还有很多杂蛋白干扰实验。
文章TAG：
回收 回收率 结合 效率 酶的回收率
